Os itens específicos necessários para a clonagem podem variar dependendo do organismo e da técnica de clonagem utilizada, mas alguns itens gerais que são frequentemente necessários incluem:
1.
DNA :Este é o material genético que será clonado. Pode vir de uma variedade de fontes, como uma célula, um tecido ou um organismo.
2.
Organismo hospedeiro :Este é o organismo que receberá o DNA clonado e produzirá cópias dele. O organismo hospedeiro é tipicamente um organismo unicelular, como uma bactéria, levedura ou alga.
3.
Enzimas de restrição :São enzimas que cortam o DNA em sequências específicas, permitindo que o DNA seja inserido no genoma do organismo hospedeiro.
4.
DNA Ligase :Esta enzima une pedaços de DNA, permitindo que o DNA clonado seja integrado ao genoma do organismo hospedeiro.
5.
Meio Seletivo :Este é um meio de cultura que permite o crescimento do organismo hospedeiro, mas inibe o crescimento de outros organismos, como contaminantes.
6.
Equipamento de Cultura :Isso inclui itens como placas de Petri, pipetas e incubadoras, que são usados para cultivar e manter os organismos hospedeiros.
7.
Kit de extração de ácido nucleico :Este kit é usado para extrair o DNA da célula doadora.
8.
Reagentes e Enzimas de Biologia Molecular :Incluem reagentes e enzimas como tampões, primers, nucleotídeos, enzimas de restrição e DNA ligase, que são usados no processo de clonagem.
9.
Clonagem de vetor :Esta é uma molécula de DNA usada para transportar o DNA clonado para o organismo hospedeiro. O vetor de clonagem contém um marcador selecionável, que permite a seleção do organismo hospedeiro, e um local de clonagem, que permite a inserção do DNA clonado.
10.
Reagentes de transformação ou transfecção :Estes são usados para introduzir o DNA clonado no organismo hospedeiro.
11.
Células Competentes :Estas são células que se tornaram competentes para absorver DNA estranho.
12.
Meios de crescimento e antibióticos :Estes são usados para cultivar e manter o organismo hospedeiro.
13.
Equipamento :Isso inclui coisas como centrífuga, termociclador, sistema de eletroforese em gel e transiluminador UV, que são usados no processo de clonagem.
14.
Equipamentos de segurança :Isso inclui itens como luvas, óculos de proteção e jalecos, que são usados para proteger o pesquisador de materiais perigosos.
